此培養基含有伊紅和美藍兩種染料作爲指示劑。蛋白腖提供細菌生長髮育所需的氮源、維生素和氨基酸，乳糖提供發酵所需的碳源，磷酸氫二鉀維持緩衝體系，伊紅和美藍抑制絕大部分革蘭氏陽性菌的生長。瓊脂是凝固劑。大腸桿菌可發酵乳糖產酸造成酸性環境時，這兩種染料結合形成複合物，使大腸桿菌菌落帶金屬光澤的深綠色，而與其他不能發酵乳糖產酸的微生物區分開。沙門氏菌形成無色菌落。金黃色葡萄球菌基本上不生長。
