1、將要保存的菌種接種於LB液體培養基中至對數生長期；2、將甘油稀釋至濃度爲百分之五十；3、將甘油、2毫升離心管、槍頭等試驗用品於121度滅菌20分鐘；4、無菌條件下將菌液與百分之五十濃度甘油1比1等體積混合於離心管中，甘油終濃度爲百分之二十五；5、將菌種和甘油的混合液於零下20度的冰箱內保存。
