限制性核酸內切酶作用特點:1、識別位點的DNA序列呈二重旋轉對稱結構;2、切割DNA均產生磷酸和羥基的末端;3、錯位切割產生具有突出的粘性末端,沿對稱軸切割雙鏈DNA產生平頭末端;4、少數不同的限制性核酸內切酶可識別和切割相同的位點。