將經過品質檢查和稀釋的新鮮精液，盛於消毒過的乾燥試管中，上面覆蓋一層經過消毒的液體石蠟，然後加塞蓋嚴，逐漸降低溫度，當溫度降到10～0℃時，即可進行保存。通用的保存方法是將盛精液的試管放在裝有冰塊或井水的廣口保溫瓶內。如用冰塊，應在冰塊上鋪一層棉花，將盛精液的試管用薄層棉花外襯紗布裹好放在上面；如用井水，可將用棉花、紗布纏裹的試管放在一個較大的試管裏，加塞蓋緊，懸掛在瓶內水中。經過上述方法處理，蓋好保溫瓶塞，精液溫度即可逐步降低。
精液保存時間的長短，決定於保存溫度和其他一些可以影響精子存活率的外界條件。一般20℃可保存6小時左右，10℃可保存12小時以上，4℃可保存24小時以上，而以0～4℃保存效果最好。經過保存的精液，使用時必須逐漸升高溫度，在38～40℃進行檢查，合格的才能輸精。
精子對溫度的改變非常敏感，保存精液時要注意溫度的驟變，以免影響成活率。稀釋後的精液降到保存的溫度要1小時以上。無論升溫或降溫，每半小時溫度變化5℃。
