蜘蛛的天敵很多。蟾蜍，蛙，蚊，蜥蜴，蜈蚣和鳥類都會捕食蜘蛛。有的寄生蜂寄生於蜘蛛卵內，有的寄生蠅的幼蟲在蜘蛛卵袋中發育，小頭蚊虻昆蟲幾乎全部都是以幼蟲的形式寄生到蜘蛛體內。這些不起眼的東西有時也會使蜘蛛致命。蜘蛛常用多種方法來禦敵，如排出毒液，隱匿，僞袋，擬態，保護色，振動等等。當逃不掉時，自己的附肢被敵害夾持時，乾脆切斷自己的附肢一走了之，自斷的步足在蛻皮時還會再生。
