1、注入密封瓶：去除鋁蓋中心部分，常規消毒瓶蓋，更換無菌針頭，將抽出的血液注入瓶內，輕輕搖勻。2、注入三角燒瓶：瓶口以棉塞及紗布嚴密包封；使用時，先將封瓶紗布鬆開，取出棉塞，並迅速在酒精燈火焰上消毒瓶口，取下針頭，將血液注入瓶內，輕輕搖勻，再將棉塞和瓶口經火焰消毒後蓋好，紮緊封瓶紗布。3、取血量：一般血培養取血5ml；亞急性細菌性心內膜炎病人，應取血10～15ml，以提高細菌培養陽性率。
