紫外線燈在室內沒有人的時候直接打開開關使用，當紫外線殺菌消毒燈打開時，人員必須離開場所，以免紫外線光波灼傷眼睛及皮。紫外線照射要有時間限制，並保證紫外線足夠的強度，照射時間一般30~60分鐘爲宜。每立方米需1.5w的紫外線消毒燈，即：每20平方米的空間需要一盞30W的紫外線消毒燈，以此類推。
