步驟:1、初染:塗片固定，草酸銨結晶紫染一分鐘，自來水沖洗；2、媒染:加碘液覆蓋塗面染約一分鐘；3、脫色:水洗,用吸水紙吸去水分，加95%酒精數滴,並輕輕搖動進行脫色,二十秒後水洗,吸去水分；4、復染:稀蕃紅染色液稀染兩分鐘後，自來水沖洗，乾燥，鏡檢。結果:革蘭氏陽性菌都呈紫色,革蘭氏陰性菌都呈紅色。
