松鼠一般以草食性爲主，食物主要是種子和果仁，也會吃鳥蛋、水果如櫻桃等。部分物種會食昆蟲，其中一些熱帶物種更會爲捕食昆蟲而進行遷徒，甚至叼走山雀雛鳥。
松鼠多在春、夏季發情，發情期大約爲兩個星期左右。松鼠繁殖的適齡期，雌性爲8到9周齡，雄鼠爲9到10周齡。在非繁殖季節，雌雄性成體分別佔據一定的地方作爲自己生活的活動範圍。在野外，雌性保護一定面積的地盤是爲了保護食物，其內不允許其他同種個體進入，對雄性個體也是如此。但是在繁殖季節，則明顯地放鬆對領域範圍的保護，允許雄性個體進入。
松鼠懷孕的時間大約爲35到40天，每年能產3胎左右，每次能產4到6只。初生松鼠體形很小，看不見東西，以母體乳汁作爲全部營養需求的來源。松鼠發育很慢，生下將近30天時才睜開眼睛。至一個半月時，小松鼠才願意到室外進行活動。
