電視劇《王的女人》於毅扮演胡亥。於毅，2001年，參演個人首部電視劇《摺扇探花》，正式進入演藝圈。2002年，參與拍攝張庭、任達華等主演的足球題材青春勵志劇《壯志雄心》，在劇中飾演劉輝一角。2003年，參演由蔣家駿執導，林心如、陸毅等人主演的代都市情感時裝勵志劇《男才女貌》，飾演趙磊。
2018年5月25日，擔任第18屆青島上合峯會城市宣傳片歌曲《青島》演唱者。7月12日，與吳京、張譯等人一起演唱中國人民解放軍2018徵兵宣傳片主題曲《青春不一樣》 。10月25日，現身山東省第十屆殘運會開幕會。10月，與胡莎莎一起演唱的2019世界軍人運動會推廣曲《擁抱這世界》。
於毅憑藉其紮實的表演功底以及對角色的理解和詮釋方式，將愛憎分明、殺敵報國的熱血英雄人物二丫頭很好地展現在了觀衆面前，令觀衆稱讚。從《打狗棍》到《勇敢的心》再到後來的《絕地槍王》，很多的槍戰戲、爆破戲，讓於毅完成了勇敢的蛻變。
